三優(yōu)生物磁陣列全人源小鼠抗體發(fā)現(xiàn)平臺(tái)重磅發(fā)布
三優(yōu)生物智能超萬(wàn)億分子發(fā)現(xiàn)平臺(tái)再添新成員。在已有的全人抗體庫(kù)、共輕庫(kù)、單域庫(kù)、多肽庫(kù)、新型靶向蛋白庫(kù)等十萬(wàn)億文庫(kù)的基礎(chǔ)上，三優(yōu)生物隆重推出了磁陣列全人源小鼠免疫抗體發(fā)現(xiàn)平臺(tái)（MIT-humAb）。該平臺(tái)整合多種重輕鏈全人源小鼠，通過(guò)全人源小鼠免疫、陣列化噬菌體抗體庫(kù)構(gòu)建、磁珠高通量篩選技術(shù)以及真核表達(dá)系統(tǒng)相結(jié)合的方法來(lái)制備全人抗體。針對(duì)任一靶點(diǎn)，該平臺(tái)可獲得數(shù)十至上百個(gè)高親和力的先導(dǎo)抗體分子，所獲抗體的親和力、序列特異性和類別豐富度等指標(biāo)均處于領(lǐng)先水平。
一、平臺(tái)背景
抗體藥物研發(fā)中，抗體發(fā)現(xiàn)是關(guān)鍵的第一步。傳統(tǒng)小鼠免疫庫(kù)技術(shù)成熟，成本相對(duì)較低，能產(chǎn)生高親和力抗體，但小鼠抗體需人源化，延長(zhǎng)了項(xiàng)目周期，且可能存在人源化失敗或者免疫原性的風(fēng)險(xiǎn)。為克服這些不足，全人源抗體轉(zhuǎn)基因小鼠應(yīng)運(yùn)而生。這類小鼠免疫球蛋白可變區(qū)基因被替換為人類基因，能直接產(chǎn)生全人源抗體，無(wú)需人源化改造，降低了免疫原性風(fēng)險(xiǎn)，并提供更高的人源抗體多樣性。隨著技術(shù)發(fā)展，全人源轉(zhuǎn)基因小鼠平臺(tái)日趨成熟，被廣泛應(yīng)用于抗體藥物研發(fā)。為了快速獲得高親和人源抗體，三優(yōu)生物隆重推出了磁陣列全人源小鼠免疫抗體發(fā)現(xiàn)平臺(tái)。該平臺(tái)利用全人源抗體小鼠免疫，可以一步產(chǎn)生高親和的人源單克隆抗體。
二、發(fā)展歷史
2016年，三優(yōu)生物作為小鼠免疫庫(kù)商業(yè)化應(yīng)用的先驅(qū)，首次提供磁陣列小鼠免疫抗體庫(kù)（Magnetic & Immunization & Tandem antibody library, MIT）構(gòu)建篩選服務(wù)。截止2025年03月，構(gòu)建2798個(gè)MIT免疫庫(kù)，累計(jì)庫(kù)容達(dá)到7.2千億，服務(wù)811個(gè)項(xiàng)目，共計(jì)獲得31200+個(gè)優(yōu)質(zhì)候選分子。時(shí)隔10年，隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展與小鼠模型的持續(xù)優(yōu)化，三優(yōu)生物隆重推出磁陣列全人源小鼠抗體發(fā)現(xiàn)平臺(tái)，該平臺(tái)整合全人源抗體轉(zhuǎn)基因小鼠與三大萬(wàn)億級(jí)抗體文庫(kù)（天然全人源庫(kù)、半合成庫(kù)、共輕鏈文庫(kù)）鼠庫(kù)雙驅(qū)，通過(guò)多維度抗體開發(fā)路徑，突破傳統(tǒng)抗體開發(fā)瓶頸，助力客戶開發(fā)first/best-in-class抗體藥物。
三、平臺(tái)特性
特性一：免疫效價(jià)高
全人源小鼠可以產(chǎn)生正常的免疫反應(yīng)，免疫后進(jìn)行效價(jià)檢測(cè)可以產(chǎn)生較高的效價(jià)。對(duì)非人源和全人源小鼠進(jìn)行小鼠免疫，取四次免疫后的血清進(jìn)行效價(jià)檢測(cè)，效價(jià)檢測(cè)結(jié)果如圖1所示，Mouse 1-2為非人源小鼠，Mouse 3-4為全人源小鼠，ELISA結(jié)果顯示，非人源小鼠和全人源小鼠四免的效價(jià)均可以達(dá)到36萬(wàn)。與非人源小鼠相比，全人源小鼠可以產(chǎn)生正常的免疫反應(yīng)，免疫效價(jià)與非人源小鼠相當(dāng)。
▲ 圖1. 四免小鼠ELISA血清效價(jià)檢測(cè)
特性二：融合了多樣化的篩選技術(shù)，速度快
三優(yōu)生物項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)豐富，可針對(duì)不同靶點(diǎn)類型制定個(gè)性化方案。首先在原材料制備與鑒定階段，重組His或Fc融合蛋白、mRNA、高表達(dá)腫瘤細(xì)胞、多肽、VLP等均可作為篩選原材料。小鼠免疫階段，共有三種全人源小鼠供選擇：Babl/c、CD1和SJL；采用多種抗原、多種佐劑、多種免疫方法，輔以多種方式的篩選策略，更易獲得多樣化抗體分子。其次在抗體庫(kù)海選及篩選階段，可采用固相海選、液相海選、固相液相交叉海選、細(xì)胞海選、蛋白細(xì)胞交叉海選、競(jìng)爭(zhēng)海選等方式，確保每個(gè)靶點(diǎn)平均可獲得數(shù)十到上百個(gè)先導(dǎo)抗體分子。最后在真核表達(dá)驗(yàn)證階段，可針對(duì)獲得的優(yōu)選分子進(jìn)行初步的成藥性分析，如：SDS-PAGE、SEC、LC-MS、ELISA、FACS和親和動(dòng)力學(xué)等生化理化檢測(cè)驗(yàn)證分子質(zhì)量。
▲ 圖2. 三優(yōu)全人源小鼠抗體發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)解決方案
特性三：高通量篩選
三優(yōu)生物將“噬菌體展示抗體庫(kù)技術(shù)”與“全人源小鼠免疫平臺(tái)”深度融合，構(gòu)建了一個(gè)高度自動(dòng)化、高通量且精準(zhǔn)的一站式篩選平臺(tái)。經(jīng)過(guò)多的持續(xù)優(yōu)化，三優(yōu)生物成功建立了全自動(dòng)化的實(shí)驗(yàn)體系，基于陣列化建庫(kù)與液相篩選相結(jié)合的一站式高通量自動(dòng)化篩選技術(shù)，大幅縮短了篩選周期，顯著提升了篩選效率，僅僅21天就可以完成文庫(kù)篩選及真核表達(dá)初步驗(yàn)證，還顯著提高了篩選通量和整體效率，為藥物研發(fā)提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支持。
四、代表案例
1、抗原背景
Target A是一種免疫檢查點(diǎn)蛋白，于1994年首次在小鼠中發(fā)現(xiàn)，主要表達(dá)于活化的T細(xì)胞、B細(xì)胞和髓系細(xì)胞表面。該蛋白通過(guò)與配體結(jié)合，抑制T細(xì)胞的激活和增殖，防止免疫系統(tǒng)過(guò)度反應(yīng)（避免自身免疫損傷）。腫瘤細(xì)胞通過(guò)高表達(dá)配體，與T細(xì)胞上的Target A結(jié)合，抑制免疫攻擊，形成“免疫抑制微環(huán)境”。
目前，已有多加公司研發(fā)針對(duì)Target A的抑制劑，用于包括黑色素瘤、非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）、腎癌、頭頸癌、胃癌等腫瘤疾病的治療。
2、抗體發(fā)現(xiàn)技術(shù)路線
為了產(chǎn)生對(duì)Target A特異性識(shí)別的抗體，利用磁陣列全人源小鼠免疫抗體發(fā)現(xiàn)平臺(tái)，篩選出多組能夠與Target A特異性結(jié)合的候選抗體，具體的篩選流程見圖3。
▲ 圖3. 抗Target A抗體發(fā)現(xiàn)的篩選流程
3、抗體發(fā)現(xiàn)關(guān)鍵結(jié)果
為了驗(yàn)證候選抗體的結(jié)合活性，采用ELISA對(duì)篩選后的抗體進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果如圖4所示，A1-A8是篩選后的候選抗體，Bench marker為陽(yáng)性對(duì)照，NC為陰性對(duì)照。A1-A8顯示出了與對(duì)照抗體Bench marker相當(dāng)或更好的結(jié)合活性。通過(guò)三優(yōu)全人源小鼠免疫庫(kù)篩選獲得的候選分子具有較好的結(jié)合活性。
▲ 圖4. 候選分子ELISA結(jié)合檢測(cè)
五、展望
三優(yōu)生物磁陣列全人源小鼠抗體發(fā)現(xiàn)平臺(tái)將助力國(guó)內(nèi)外藥企和醫(yī)療機(jī)構(gòu)產(chǎn)生針對(duì)各種疾病靶點(diǎn)的高親和力、高特異性抗體，在腫瘤免疫治療、自身免疫疾病研究及感染性疾病防控等領(lǐng)域發(fā)揮日益重要的作用。同時(shí)，結(jié)合人工智能和高通量篩選技術(shù)，將能更快速地識(shí)別和優(yōu)化候選抗體，從而顯著縮短藥物開發(fā)周期，為全球患者帶來(lái)更多治療選擇。
關(guān)于三優(yōu)生物
三優(yōu)生物是一家以“運(yùn)用創(chuàng)新生物藥提高人類的生活品質(zhì)”為愿景，以“讓天下沒有難做的創(chuàng)新生物藥”為使命的生物醫(yī)藥高新技術(shù)企業(yè)。公司總部位于中國(guó)上海，在美國(guó)、歐洲等地設(shè)有子公司，現(xiàn)有投產(chǎn)及布局的研發(fā)及GMP場(chǎng)地20000多平方米。
公司以智能超萬(wàn)億分子庫(kù)為核心，打造了國(guó)際領(lǐng)先的創(chuàng)新生物藥臨床前智能化及一體化研發(fā)平臺(tái)，通過(guò)“新藥發(fā)現(xiàn)、臨床前研究、智能化藥物研發(fā)及前沿科學(xué)研究”等四個(gè)維度加速創(chuàng)新生物藥物的研發(fā)進(jìn)程。
公司為合作伙伴提供“差異化CRO、整合型CDO、協(xié)同型CPO、特色CRS”于一體的“創(chuàng)新生物藥4C綜合業(yè)務(wù)”。公司已建立全球營(yíng)銷網(wǎng)絡(luò)，已與全球1200多家藥企、生技公司等建立了良好的合作關(guān)系；已完成了1200多個(gè)新藥發(fā)現(xiàn)及開發(fā)服務(wù)項(xiàng)目；已完成了50多個(gè)合作研發(fā)項(xiàng)目，其中9個(gè)合作項(xiàng)目已完成臨床申報(bào)；公司開發(fā)了數(shù)千種品牌試劑。
公司已獲得國(guó)家高新技術(shù)、上海市專精特新、上海市小巨人和上海“張江之星”企業(yè)認(rèn)定。
